粗多糖提纯的方法有哪些
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时间:2024-08-17 11:18:20
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粗多糖提纯的方法有哪些【专家解说】:、糖提取
1 热水浸提
其步骤:原料→粉碎→脱脂→粗提(2-3)→吸滤或离→沉淀→洗涤→干燥
2 微波辅助提取
3超声波辅助与规提取相比具提取间
【专家解说】:、糖提取
1 热水浸提
其步骤:原料→粉碎→脱脂→粗提(2-3)→吸滤或离→沉淀→洗涤→干燥
2 微波辅助提取
3超声波辅助与规提取相比具提取间短、产率高、需加热等优点[17]
4 索氏提取:(索氏提取器石油醚)
5 醇提:(乙醇)
醇提简单易于操作提取率较低乙醇使用量宜规模提取使用
6 其:
糖提取稀碱液浸提、稀酸液浸提、酶等由于稀酸、稀碱条件易使糖发糖苷键断裂部糖发水解使糖提取率减少试验避免采用稀碱液浸提稀酸液浸提
二、糖纯化
糖杂质除 粗糖往往混杂着蛋白质、色素、低聚糖等杂质必须别除
1 除蛋白质用
1) 沙维积(Sevag):
2) 三氟三氯乙烷
3) 三氯醋酸
4) 酶解:品溶液加入蛋白质水解酶胃蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、链霉蛋白酶等使品蛋白质降解通其与Sevag综合使用除蛋白质效较
5 )盐酸:取品浓缩液用2mol/L盐酸调节其PH至3放置夜3000r/min条件离弃沉淀即脱蛋白质
6) 其:加入5%ZnSO4溶液饱Ba(OH)2溶液振荡离蛋白除蛋白够彻底结合Sevag使用提取液加入50%TCA溶液至沉淀完全4000r/min条件离10min收集清液即除蛋白液
使用4:1氯仿-乙醇溶液除蛋白混合液清摇再静置取清液程需重复除尽蛋白
除蛋白质品用紫外光光度计检验观察280mm处否吸收吸收则表明蛋白质已经除尽
2 除色素
1)性炭
2)弱碱性树脂: 于植物源糖能含酚型化合物颜色较深类色素呈负性离能用性炭吸收剂脱色用弱碱性树脂DEAE纤维素或DuoliteA-7吸附色素
3)氧化脱色: 若糖色素结合易DEAE纤维素吸附能水洗脱类色素进行氧化脱色:浓氨水或NaOH液调至PH8.0左右50℃滴加H2O2至浅黄色保温2
4)乙醚水乙醇洗涤:依用丙酮、水乙醚水乙醇洗涤糖即较纯净糖较简单便于操作糖损失较
5)用4:1氯仿-丁醇除色素操作简单糖定损失
6)发酵源糖颜色般较浅色素含量较少般除色素
3 除低聚糖等杂质
1)采用逆向流水透析即准备桶蒸馏水用根导管水通入透析袋烧杯底部另用根导管水引根据水量控制流速使水缓慢流48糖半精品
2)利用溶液浓度扩散效应量物质机盐、低聚糖等透析袋渗透袋外蒸馏水断换水即保持浓度差除尽杂质具体做根据糖溶液体积截取相应度透析袋用透析夹夹住端灌入糖液离液面2-3cm处夹紧透析袋置于烧杯注入蒸馏水至完全浸没透析袋用磁力搅拌器慢速搅拌每12换水重复3-4
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