PCR-DGGE技术在农村户用沼气发酵微生物研究中的初步应用

【摘要】：通过PCR-DGGE技术,对北京郊区一运行良好的农村户用沼气池的细菌多样性分析,分别在1、3、4、5月份采集沼气池的厌氧活性污泥样品,提取厌氧活性污泥微生物总DNA,对其16S rDNA基因的V3可变区进行扩增,结合DGGE(变性梯度凝胶电泳)技术,跟踪检测微生物的动态变化,并利用软件对DGGE图像进行聚类分析.测定了厌氧活性污泥DGGE胶上优势和差异条带16S rDNAV3区片段序列,通过与NCBI数据库中的序列基因库比对,初步确定细菌的种属.结果表明:农村户用沼气池中发酵微生物种类较为丰富,但有明显的优势种群,随着气温变化,微生物多样性基本稳定,但种群丰度有明显变化,DGGE图谱中的优势条带16S rDNA基因序列经比对后都属于未培养的细菌. 【作者单位】： 华中师范大学生命科学学院 华中师范大学生命科学学院 中国农业科学院生物技术研究所 中国农业科学院生物技术研究所 中国农业科学院生物技术研究所 中国农业科学院生物技术研究所
【关键词】： 变性梯度凝胶电泳(DGGE) 农村户用沼气池 细菌 动态变化
【基金】：国家自然科学基金资助项目(30671209)
【分类号】：S216.4
【正文快照】： 发展沼气是解决我国农村能源危机,改善农村生态环境,实现农业可持续发展的有效途径.目前,我国在农村沼气推广和相关工程、工艺改进方面做了大量工作,积累了丰富经验,但沼气发酵微生物研究相对薄弱,关于沼气微生物群落结构与功能关系认识非常有限,极大地限制了沼气技术的进一

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