不同处理条件下转Bt基因大豆秸秆中毒蛋白降解的研究

【摘要】： 随着转Bt基因作物种植面积增加,转基因作物的秸秆处理及秸秆中Bt毒蛋白的降解研究值得重视。本实验以转Bt基因大豆的秸秆为实验材料,用非转基因大豆的秸秆作为对照,将秸秆置于田间地表,埋于耕层及进行发酵等处理,用酶联免疫吸附法(Elisa)研究不同处理方法转基因大豆根,茎,叶及豆皮中Bt毒蛋白的降解。结果如下: 1.转Bt基因大豆的秸秆的根,茎,叶和豆皮内毒蛋白含量有差异,含量分别为753.0868ng/g,630.1677ng/g,1053.397ng/g和241.254ng/g。 2.在不同处理条件下,根,茎,叶和豆皮内的毒蛋白的降解存在差异。降解速度从快到慢依次为:土埋处理,地表处理和发酵处理。 3.根据对根,茎,叶和豆皮内Bt毒蛋白降解的研究表明:转Bt基因大豆秸秆不同部位Bt毒蛋白的降解存在差异。各部位降解从快到慢的顺序依次为豆皮,根,茎和叶。 4.各种不同处理条件下秸秆中Bt毒蛋白降解的百分比分析表明,在处理0-10天之间,转Bt基因大豆秸秆中毒蛋白的降解比率最高,10-30天之间降解慢下来,处理30天后,几乎检测不到Bt毒蛋白。 【关键词】：秸秆 Bt毒蛋白 降解 酶联免疫吸附测定法 处理
【学位授予单位】：上海交通大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：S565.1;S38
【目录】：

• 摘要2-3
• ABSTRACT3-8
• 第一章 前言8-23
• 1 Bt 基因的应用及BT 毒蛋白的杀虫机制8-12
• 1.1 Bt 基因的分类9
• 1.2 Bt 基因的应用9-12
• 2 Bt 基因对农业生态系统安全性的研究12-19
• 2.1 转Bt 基因作物对生物的影响12-16
• 2.2 转Bt 基因作物对土壤生态环境的影响16-18
• 2.3 展望18-19
• 3 ELISA 概述19-21
• 3.1 Elisa 原理20
• 3.2 Elisa 方法20
• 3.3 Elisa 结果的影响因素20-21
• 4 研究的目的与意义21-23
• 第二章 实验材料和方法23-27
• 1 转基因大豆材料准备23-24
• 1.1 转基因大豆的种植23
• 1.2 转基因大豆的收获与采集23
• 1.3 转基因大豆的粉碎处理23
• 1.4 转基因大豆的取样23-24
• 2 仪器24
• 3 Bt 毒蛋白的检测24-25
• 3.1 样品处理24
• 3.2 ELISA 测定24-25
• 4 缓冲液25-26
• 4.1 样品提取液25-26
• 4.2 抗体/二抗稀释液26
• 4.3 底物缓冲液26
• 4.4 洗涤液26
• 4.5 终止液26
• 5 数据统计分析26-27
• 第三章 实验数据结果与分析27-42
• 1 不同处理条件下转Bt 基因大豆秸秆中毒蛋白的降解情况27-38
• 1.1 地表处理方式下转Bt 基因大豆秸秆各组织中毒蛋白的含量27-30
• 1.2 土埋处理方式下转Bt 基因大豆秸秆各组织中毒蛋白的含量30-34
• 1.3 发酵处理方式下转Bt 基因大豆秸秆各组织中毒蛋白的含量34-38
• 2 不同组织毒蛋白降解的比较38-42
• 2.1 不同组织初始Bt 毒蛋白的比较38-39
• 2.2 不同组织在经过10，30 和50 天处理后Bt 毒蛋白降解的研究39-42
• 第四章 讨论42-44
• 第五章 主要结论44-45
• 参考文献45-52
• 致谢52-53
• 攻读学位期间发表的学术论文目录53-55

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