秸秆降解菌的诱变筛选及降解效果研究

【摘要】： 试验利用不同种类的碳源、氮源对绿色木霉ZJ纤维素酶诱导合成的影响进行了研究,并以绿色木霉ZJ为出发菌株,利用紫外线诱变、硫酸二乙酯诱变和DES-紫外线复合诱变三种诱变剂对出发菌株绿色木霉ZJ进行处理,筛选纤维素酶高产菌株。最后试验采用菌种——绿色木霉(Trichoderma vivid)ZJ、变色栓菌(Trametes versicolor)、糙皮侧耳菌(Pleurotus ostreatus)等产纤维素酶和产木质素酶菌株进行组合,为稻草秸秆的降解提供依据。 试验结果表明: 1.结构比较完整的纤维类物质作为碳源时对纤维素酶的产生具有较强的诱导作用;接种后3~4 d收获绿色木霉ZJ株培养物可获得最大产酶量;以1% (NH4)2SO4和2%酵母膏组成的复合氮源在菌株的生长和诱导产酶方面均比单一氮源要好。 2.利用紫外线诱变、硫酸二乙酯诱变和DES-紫外线复合诱变三种诱变剂对出发菌株绿色木霉ZJ进行处理,结果表明三种诱变方法中以DES-紫外线复合诱变的效果最佳,正突变率最高,负突变率最低。最后筛选出一株纤维素酶产酶量高且性状稳定的高产菌株L4C,其CMC酶活和滤纸酶活较出发菌株分别提高了122.13、124.51倍。 3.用稻草秸秆为基质进行单菌一菌种和混菌发酵,实验表明,对于木质素的降解绿色木霉ZJ和诱变菌株L4C的效果不及其他,而混菌发酵又较单独的白腐真菌发酵降解效果好;混菌发酵对纤维素的降解效果最好,其中以糙皮侧耳菌+L4C组合为佳,对中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维、木质素,纤维素的降解率分别为16.96%,23.77%,42.99%,27.21%,均高于其他组合。 【关键词】：稻草秸秆 绿色木霉 诱变 降解
【学位授予单位】：甘肃农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：S816
【目录】：

• 摘要5-6
• SUMMARY6-10
• 第一章 文献综述10-25
• 1 秸秆的微生物降解11-13
• 1.1 降解秸秆的微生物种类12
• 1.2 秸秆的微生物降解12-13
• 2 纤维素降解的研究进展13-15
• 2.1 纤维素酶的来源14
• 2.2 纤维素酶的组成与结构14-15
• 3 木质素降解的研究进展15-20
• 3.1 木质素降解酶系15-16
• 3.2 白腐真菌木质素降解酶的理化特性16-18
• 3.3 白腐真菌产木质素酶的营养调控18-19
• 3.4 白腐真菌的降解机理19-20
• 4 诱变筛选高效产酶菌株的研究进展20-23
• 4.1 物理诱变20-21
• 4.2 化学诱变21-22
• 4.3 复合诱变22-23
• 5 研究内容及目的23-25
• 5.1 研究目的23-24
• 5.2 技术路线24-25
• 第二章 绿色木霉合成纤维素酶部分培养条件的优化25-32
• 1 材料与方法25-28
• 1.1 菌种25
• 1.2 培养基25-26
• 1.3 绿色木霉的培养26
• 1.4 菌丝称重26
• 1.5 纤维素酶酶活力的测定（主要为羧甲基纤维素酶的测定）26-27
• 1.6 不同培养时间纤维素酶酶活力的测定27
• 1.7 碳源诱导物对绿色木霉生长和产酶活力的影响测定27
• 1.8 氮源诱导物对绿色木霉生长和产酶活力的影响测定27-28
• 2 结果与分析28-30
• 2.1 培养时间对绿色木霉产酶量的影响28
• 2.2 碳源对绿色木霉生长和合成纤维素酶的影响28-30
• 3 讨论30-32
• 第三章 产纤维素酶菌株的诱变32-40
• 1 材料与方法32-36
• 1.1 材料32-33
• 1.2 方法33-36
• 2 结果与分析36-39
• 2.1 诱变结果36-37
• 2.2 复筛结果37-39
• 3 小结39-40
• 第四章 多菌种混合降解稻草秸秆效果的研究40-48
• 1 供试材料40-42
• 1.1 菌种40
• 1.2 稻草秸秆40-41
• 1.3 培养基41
• 1.4 主要试剂41-42
• 2 方法42-43
• 2.1 黄曲霉毒素鉴定42
• 2.2 酶活测定42-43
• 2.3 孢子悬液制备43
• 2.4 固态发酵试验设计43
• 2.5 纤维指标分析测定43
• 2.6 数据统计方法43
• 3 结果与分析43-47
• 3.1 黄曲霉毒素鉴定结果43-44
• 3.2 待试菌株的产酶分析44
• 3.3 绿色木霉ZJ 产纤维素酶分析44
• 3.4 变色栓菌产木质素酶分析44-45
• 3.5 糙皮侧耳菌产木质素酶分析45
• 3.6 稻草秸秆的发酵结果与分析45-47
• 4 小结47-48
• 第五章 结论48-50
• 致谢50-51
• 参考文献51-56
• 作者简介56-57
• 导师简介57

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