降解秸秆的白腐真菌的筛选、优化及混菌发酵研究

【摘要】：本文对现有的木质素降解菌-白腐真菌进行筛选，将筛选出的生长良好、降解木质素能力强的菌株进行优化，并与与纤维素降解菌绿色木霉混合协同发酵降解秸秆，并对二者混合发酵工艺条件优化试验，最终通过两级离体体外消化实验进行评价，得到如下结论： 1．初筛的6个菌中尤其以黄孢原毛平革菌（Phanerochaete chrysosporium）和平菇（Pleurotus ostreatus）的纤维素酶、半纤维素酶的酶活最高，而红芝（Ganoderma）产Lip和Mnp的能力明显优于其他菌株，说明红芝（Ganoderma）具有较强的木质素降解能力。 2．通过对产酶条件的单因素和正交分析试验，研究了不同培养条件对秸秆木质素和纤维素降解效果的影响。确定了红芝、黄孢原毛平革菌和绿色木霉二步混合发酵降解秸秆的产酶条件：马铃薯200g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨5g/L，pH6.0，转速130rpm，装液量70mL，32℃培养，发酵到第10d左右粗酶液酶活达到12.7U/mL。 3．利用单因素和正交试验分析得出秸秆发酵的最优条件如下：培养基的含水量为60%，温度在30℃，接种量为0.25g/kg秸秆，酸度控制在pH为5.0，在优化的发酵条件下，稻草木质素的降解率为40.78％；麦秸木质素的降解率为37.65%。 4．将降解木质素的红芝、黄孢原毛平革菌和降解纤维素的绿色木霉做平板拮抗试验，发现绿色木霉生长优势较强，对白腐菌有竞争性抑制作用。因此，需将两种菌进行二步混合发酵降解秸秆。由不同的混合发酵方式所产生的降解效果来看，经过优化处理后，木质素的降解率与优化前相比，降解率大大提高，红芝在先培养6天，接入绿色木霉共培养6~8天左右，木质素、纤维素降解率均达到最高，其中稻草的木质素降解率达到49.06%，麦秸的木质素降解率达到50.99%，黄孢原毛平革菌在先培养6~9天后接入绿色木霉共培养6~10天左右，纤维素和木质素的降解率达到最高，其中稻草的木质素降解率达到49.34%，麦秸的木质素降解率达到49.96%. 5．将优化处理后的饲料样品进行两级离体体外消化试验分析，发现木质素降解率好的混菌组合DM消化率麦秸普遍在40%~60%之间，稻草的DM消化率在40%~50%之间，麦秸的DM消化率优于稻草。 【关键词】：秸秆降解 混合发酵 白腐真菌 木质素 发酵条件优化 两级离体
【学位授予单位】：甘肃农业大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：X172
【目录】：

• 摘要2-4
• Summary4-6
• 目录6-9
• 第一章 绪论9-16
• 1.1 立题背景和意义9
• 1.2 白腐真菌的研究进展9-12
• 1.2.1 白腐菌的生物学背景及其木质素降解酶系10-12
• 1.3 绿色木霉的生物降解功能12-14
• 1.3.1 对纤维素的降解功能12
• 1.3.2 对几丁质的降解功能12-13
• 1.3.3 对木聚糖的降解功能13
• 1.3.4 对其他物质的降解功能13-14
• 1.4 混合菌种发酵稻秆的研究进展14-16
• 1.4.1 微生物混合发酵的特点14-15
• 1.4.2 微生物混合发酵注意事项15-16
• 第二章 木质素降解菌-白腐真菌的筛选16-31
• 2.1 引言16
• 2.2 材料和方法16-17
• 2.2.1 材料16
• 2.2.2 培养基16-17
• 2.3 主要试剂17
• 2.4 标准曲线的制作17-18
• 2.4.1 葡萄糖标准曲线的制作17-18
• 2.4.2 木糖标准曲线的绘制18
• 2.5 实验方法18-21
• 2.5.1 菌种活化18
• 2.5.2 液体培养18-19
• 2.5.3 发酵19
• 2.5.4 活性粗酶液制备19
• 2.5.5 酶活力测定方法19-20
• 2.5.6 稻草培养基纤维素、半纤维素、木质素降解率的测定20-21
• 2.5.7 结果计算21
• 2.6 结果和分析21-28
• 2.6.1 葡萄糖标准曲线21-22
• 2.6.2 木糖标准曲线22
• 2.6.3 各菌株在稻草培养基上木质素降解酶活性的变化22-25
• 2.6.4 稻草培养基纤维素酶与半纤维素酶活力的变化25-27
• 2.6.5 稻草培养基中纤维素、半纤维素、木质素降解率的变化27-28
• 2.7 结果分析28-29
• 2.8 讨论29-31
• 第三章 白腐真菌产漆酶条件的优化31-42
• 3.1 材料与方法31-33
• 3.1.1 试验材料31
• 3.1.2 试验方法31-33
• 3.2 结果与分析33-40
• 3.2.1 C 源、N 源对漆酶分泌的影响结果33-34
• 3.2.2 环境条件对漆酶分泌的影响结果34-38
• 3.2.3 多因素优化试验38-40
• 3.3 结果分析40-41
• 3.4 讨论41-42
• 第四章 白腐真菌发酵秸秆条件的优化42-54
• 4.1 引言42
• 4.2 材料与方法42-43
• 4.2.1 试验材料42
• 4.2.2 试验方法42-43
• 4.2.3 测定指标及方法43
• 4.3 结果与分析43-53
• 4.3.1 单因素影响结果分析43-46
• 4.3.2 正交实验结果分析46-52
• 4.3.3 分析52-53
• 4.4 讨论53-54
• 第五章 秸秆降解菌二次发酵模式的构建54-64
• 5.1 引言54
• 5.2 材料与方法54-56
• 5.2.1 实验材料54-55
• 5.2.2 实验方法55-56
• 5.2.3 秸秆降解菌的搭配及混合发酵56
• 5.2.4 木质素、纤维素含量的测定56
• 5.3 试验设计56-57
• 5.4 结果与分析57-62
• 5.4.1 绿色木霉产纤维素酶酶活测定57
• 5.4.2 菌株兼容性试验结果57-58
• 5.4.3 秸杆降解菌的混合发酵试验结果58-62
• 5.5 讨论62-64
• 第六章 混菌发酵的干物质消化率评价64-69
• 6.1 材料和方法64-66
• 6.1.1 发酵饲料64
• 6.1.2 标准苜蓿草样的设置64
• 6.1.3 羊粪液的制备64-65
• 6.1.4 胃蛋白酶65
• 6.1.5 体外消化试验操作步骤65-66
• 6.1.6 测定指标及方法66
• 6.2 结果分析66-68
• 6.2.1 两级离体消化试验中应用采集的羊粪液多次测定标准苜蓿草样干物质消化率及校正系数66
• 6.2.2 两级离体消化试验中校正系数66
• 6.2.3 校正系数 F 的计算公式66
• 6.2.4 黄孢原毛平革菌和红芝与绿色木霉发酵麦秸和稻草体外 DM 消化率66-68
• 6.3 展望68-69
• 第七章 结论69-70
• 参考文献70-75
• 致谢75-76
• 个人简介76-77
• 导师简介77-78

您可以在本站搜索以下学术论文文献来了解更多相关内容

白腐菌纤维素酶高酶活菌株的筛选    费尚芬;鹿宁;刘坤;刘毅;

白腐真菌F9产漆酶发酵条件的优化    艾良;朱启忠;李文静;宋炳红;

应用羊粪液取代瘤胃液两级离体消化试验的探索    吴天星,彭大惠,杨诗兴

提高秸秆饲料利用率和营养价值的研究进展    郭旭生,崔慰贤

白腐真菌在秸秆作物资源开发中的研究    赵红霞,杨建军,詹勇

利用食用菌开发秸秆饲料    钟德山，宁康键，应如海，彭光明

固氮菌和纤维素分解菌的混合培养及其对生活垃圾降解的影响    蒲一涛,钟毅沪,周万龙

纤维素酶制备工艺的研究    曾家豫,冯克宽,刘国安,王兰州,王明谊

多元混菌发酵对纤维素酶活性的影响    涂璇,薛泉宏,司美茹,龚明福

白腐真菌的辐射诱导及酶学性质的研究    张变英;王芳;

白腐真菌降解石油的影响因素    谭丽泉;陈世斌;周焕清;

Effects of White-Rot Fungi Composting on Wood Powder-Chicken Manure Mixture    

Optimization of South China 5 Cassava-Leucaena Protein Feed Production by Kombucha in Solid-State Fermentation    

Production of Protein Feedstuff by Mixed Fermentation of Waste Lees    

一株纤维素酶产生菌的固态发酵初步研究    叶生梅,王岚岚,欧阳明

白腐真菌及其漆酶的应用研究    吴晴;

食用菌对稻糠中粗纤维降解能力的比较研究    王立新;张绪银;

大黄对蛋鸡产蛋性能及蛋品质的影响    王飞;李勇;

白腐菌纤维素酶高酶活菌株的筛选    费尚芬;鹿宁;刘坤;刘毅;

生物降解木质素研究新进展    张辉;戴传超;朱奇;杨启银;

用白腐真菌-泥炭净化处理DDNP废水的研究    王惠娥;孙继林;颜事龙;张学才;

卢氏绿壳蛋鸡孵化过程中钙磷转化规律与鸡胚生长分析    雷雪芹;徐廷生;贾翠玲;刘宁;

宁都黄鸡两个出栏日龄的体格发育及产肉性能差异    吴红翔;藩东福;张乐红;廖燕妮;刘三凤;

利用正交试验设计研究葡萄糖处理豆粕对奶牛过瘤胃蛋白的影响    王潍波;赵国琦;

含水量对糖处理豆粕过瘤胃蛋白影响的研究    王潍波;赵国琦;郭熠洁;

猪场周围环境氮、磷、铜的分布及其安全性评价    谭新;方热军;

酶菌共降解玉米秸秆的研究    陈合;张强;

微生物对堆肥过程中氮素影响的研究    杨柳;付利芝;杨松全;

油脂添加水平对罗氏沼虾生长性能、血液生化指标及体组织脂肪酸组成的影响    孙龙生;王恒;

甲酸添加剂对鹅观草青贮品质的影响    冀旋;邵新庆;娜日苏;玉柱;

银胶菊化感潜力及其潜在化感物质的分离鉴定    陈业兵

麦秆液化制备可降解聚氨酯泡沫材料方法及机理研究    陈秋玲

啤酒厂剩余污泥堆肥高效菌群构建及其新型堆肥工艺研究    潘飞

稻壳制备燃料乙醇及综合利用    麻越佳

苹果渣固态发酵高蛋白产量菌株筛选及发酵条件研究    刘芸

不同生态因子下LMBR处理制药废水运行效能及数学模型    白羽

品种与栽培技术对玉米产量及青贮质量的影响    冯鹏

纳米多孔金属材料在生物催化和生物传感中的应用研究    邱华军

乳酸杆菌对肉鸡生产性能、免疫机能及肠道菌群的影响    郭元晟

饲粮不同来源淀粉对断奶仔猪肠道功能和健康的影响及机理研究    相振田

产聚半乳糖醛酸酶菌株的筛选、发酵条件及酶学性质的研究    胡慧磊

一株热带假丝酵母利用木糖生长及其产酒精特性的研究    刘兰杰

混凝-Fenton法及白腐真菌处理DDNP废水的研究    牛菲菲

木质层孔菌产MnP培养体系优化及酶学性质研究    陈聪

固态混菌发酵纤维素酶工艺研究    罗永生

玉米秸秆腐解复合菌系CSS-1的构建、菌群组成及腐解特性研究    刘尧

耐盐碱产纤维素酶芽孢杆菌的选育及酶学特性的研究    桂春燕

丁酸钠对商品肉仔鸡的促生长机理和应用功效研究    邹杨

SF_6示踪法测定荷斯坦奶牛能量代谢的研究    杨占山

黄芪对肉鸡生产性能、免疫性能和抗氧化性能影响的研究    杨恒伟

混合培养对固氮菌和纤维素分解菌生长及固氮的影响    蒲一涛,钟毅沪,郑宗坤

正交试验优化精制酪氨酸的工艺条件    郝静,张关永

纤维素酶研究现状及其在畜牧业中的应用    戴四发,金光明,王立克,黎观红,胡忠泽,闻爱友,蔡治华,程育昕

几种食用真菌对甘蔗渣利用的研究    吴萍,李正鹏,孙涛

高效秸秆发酵剂优良菌种的分离筛选与鉴定    孙力军,商常发,钟德山,张树杰,张忠诚

绿色木霉对黄瓜灰霉病的防治作用    周红姿,李宝聚,刘开启,石延霞,宋卫国

抗药性木霉菌研究进展    周红姿,李宝聚,刘开启

绿色木霉AS3.3711的葡聚糖内切酶Ⅰ基因的克隆与表达    刘北东,杨谦,周麒,宋金柱,陈佃福,刘恒,赵敏

UASB-生物接触氧化-絮凝沉淀法处理皂素废水    张志扬,李江华,贾丽云,谭丁

漆酶及其应用    李洪臣;于秀俊;杨秀艳;

白腐真菌对稻草木质纤维素的降解试验    谢菊兰;吕晓星;肖兵南;周望平;

He-Ne激光选育高木质素降解率的白腐真菌L_x    郭爱莲,徐金贵,杨琳

白腐真菌在碳素循环中的地位和作用    李慧蓉

用白腐真菌降解难降解环境污染物    

白腐真菌在木质素微生物降解中的作用    范寰;梁军峰;赵润;张金凤;张洪生;

白腐真菌降解木质素的营养调控    席冬梅,邓卫东

白腐真菌对染料废水脱色及降解的研究    梁利华,杨东虎,阚振荣

白腐真菌木质素降解酶的研究及应用进展    张晶,黄民生,徐亚同

木质素生物降解研究进展    吴坤,张世敏,朱显峰

紫外、离子注入法对白腐真菌诱变效应的初步研究──多酚氧化酶菌株的选育    荚荣,肖亚中,王硕为,朱强

白腐真菌液体发酵培养基的优化研究    范寰;王文杰;

固氮红细菌转化无机硒的发酵条件优化    张秀格;王东亮;肖敏;

白腐真菌在环境生物修复中的研究概况    李梦杰;王翠玲;李荣春;

用于印染废水脱色的白腐真菌总DNA的提取及特异性扩增研究    谢冰;马丽华;黄民生;樊丽;

白腐真菌在环境生物修复中的研究概况    李梦杰;王翠玲;李荣春;

白腐真菌的DNA提取和RAPD研究初探    马丽华;谢冰;黄民生;

白腐真菌胞外生物合成蛋白质-Pb微米颗粒的研究    王亮;陈桂秋;张文娟;

白腐菌对城市污泥堆肥效率及木质纤维素降解的影响    隆梦佳;鲁娟;胡承孝;孙学成;谭启玲;

染料投加时间对非灭菌环境白腐真菌降解活性染料的影响    高大文;文湘华;周晓燕;曾永刚;钱易;

用白腐真菌-泥炭净化处理DDNP废水的研究    王惠娥;孙继林;颜事龙;张学才;

新技术解决畜禽粪便污染大问题    

珍惜资源 保护环境    冬龙 　　

粗饲料生物发酵剂研究及进展    吉林农业大学动物科技学院 冀凤杰

淘汰POPs需加紧开发适用技术    李宏乾

黄曲霉毒素的传统去毒方法和生物降解研究进展    王宁　马秋刚 张建云 胡新旭 计成

固态发酵豆粕在饲料中的研究应用    山东轻工业学院食品与生物工程学院 卫琳　宋俊梅 黄永锋

接种白腐真菌改善含铅农业固废微环境及其作用机理的研究    胡霜

白腐真菌反应器中细菌的抑制方法研究    周成

组合式白腐真菌反应器处理实际染料废水过程中生态结构和功能解析    高尚

白腐真菌对持久性有机物PFOA和雌激素E2的降解研究    周莉娜

白腐真菌Hypocrea lixii AH对抚顺长焰煤及其模型化合物生物液化机理研究    石开仪

白腐真菌细胞色素P450转化难降解有机物的功能研究    宁大亮

白腐真菌培养废弃物吸附阳离子染料的研究    周崎

新型纤溶酶得产生菌选育、发酵优化及酶学性质研究    范晓丹

糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）降解棉浆黑液木质素的研究    赵丽红

除虫菊内生真菌分离、鉴定及其代谢产物抑菌活性研究    易晓华

降解秸秆的白腐真菌的筛选、优化及混菌发酵研究    韦丽敏

文昌红树林微生物细胞毒活性物质的筛选    陈华

产琼胶酶菌株Agarivorans albus QM38的发酵条件优化、酶的分离纯化及酶学性质研究    解卉

高产普鲁兰菌株的诱变筛选及发酵条件优化    相茂功

产壳聚糖酶菌株的发酵条件优化、壳聚糖酶的分离纯化与酶学性质研究    段妍

高温α-淀粉酶产生菌的遗传改良及发酵工艺优化    杨艳华

L-异亮氨酸产生菌的选育及发酵条件优化    李进

纺织用角质酶的发酵法生产及其应用    毕凤珍

聚乙烯醇降解酶产生菌的筛选、发酵条件优化及酶的初步应用研究    宋朝霞

米根霉L-乳酸高产菌株的选育及发酵条件优化    付萍