高寒草地真菌纤维素降解酶系及其对油菜秸秆降解活性的研究
高寒草地真菌纤维素降解酶系及其对油菜秸秆降解活性的研究【摘要】:在我国北方尤其是高寒地区,油菜秸秆通常被农牧民用作燃料,造成了资源浪费和环境污染。探索一种构建高效降解油菜秸秆细胞壁
【学位授予单位】:甘肃农业大学
【学位级别】:博士
【学位授予年份】:2012
【分类号】:X172;X712
【目录】:
- 摘要3-5
- Abstract5-11
- 第一章 文献综述11-26
- 1 纤维素类物质资源及研究降解纤维素类物质真菌的意义11-12
- 1.1 纤维素类物质资源11
- 1.2 研究降解纤维素类物质真菌的意义11-12
- 2 降解纤维素类物质真菌的研究方法12-16
- 2.1 分离方法12
- 2.2 筛选方法12-16
- 2.2.1 初步筛选12-13
- 2.2.2 复选13-16
- 2.2.2.1 酶活力筛选法13
- 2.2.2.2 合菌群筛选法13-14
- 2.2.2.3 诱变选育法14-15
- 2.2.2.4 基因筛选法15-16
- 2.3 降解纤维素类物质真菌DNA多态性分析16
- 3 高寒草地降解纤维素类物质微生物生态过程和功能的研究16-21
- 3.1 我国草地微生物生态的研究概况17
- 3.2 微生物功能群的界定及降解纤维素类物质微生物的生态学研究17-19
- 3.2.1 微生物功能群的界定17-18
- 3.2.2 高寒草地降解纤维素类物质微生物的生态学研究18-19
- 3.3 降解纤维素类物质微生物的生态过程19-20
- 3.4 高寒草地降解纤维素类物质微生物多样性与生态系统功能20
- 3.5 存在的问题20-21
- 4 高寒地区油菜秸秆资源及再生利用的意义21-24
- 4.1 油菜秸秆资源21
- 4.2 油菜秸秆资源的利用状况21-23
- 4.3 高寒地区油菜秸秆资源再生利用的意义23-24
- 5 论文的研究意义、研究内容和技术路线24-26
- 5.1 研究意义24
- 5.2 研究内容24-25
- 5.3 技术路线25-26
- 第二章 纤维素分解真菌和产纤维素酶菌株的筛选及分子鉴定26-38
- 1 材料与方法27-30
- 1.1 供试菌株及来源27
- 1.2 培养基27-28
- 1.3 研究方法28-30
- 1.3.1 初步筛选28
- 1.3.1.1 羧甲基纤维素钠平板培养基筛选法28
- 1.3.1.2 滤纸平板培养基筛选法28
- 1.3.1.3 滤纸分解度实验28
- 1.3.2 产酶菌株复选28-30
- 1.3.2.1 绘制标准曲线28-29
- 1.3.2.2 粗酶液的制备29
- 1.3.2.3 酶活力测定29-30
- 1.3.3 纤维素分解真菌菌株的稳定性测定30
- 1.3.4 rDNA-ITS鉴定30
- 2 结果与分析30-35
- 2.1 初步筛选结果30-32
- 2.2 复选结果32
- 2.3 菌株的稳定性及酶活力测定结果32-33
- 2.4 分子鉴定结果33-35
- 3 讨论35-37
- 4 小结37-38
- 第三章 产漆酶菌株的筛选、鉴定及产酶条件的初步研究38-47
- 1 材料与方法39-40
- 1.1 供试菌株39
- 1.2 培养基39-40
- 1.3 研究方法40
- 1.3.1 初步筛选40
- 1.3.2 粗酶液的制备及漆酶活力测定40
- 1.3.3 rDNA-ITS鉴定40
- 1.3.4 产酶条件的研究40
- 1.4 数据处理及分析40
- 2 结果与分析40-45
- 2.1 初步筛选结果40-41
- 2.2 复选结果41
- 2.3 分子鉴定结果41-42
- 2.4 产漆酶条件的研究结果42-45
- 2.4.1 温度对菌株310b产漆酶的影响42
- 2.4.2 初始pH值对菌株310b产漆酶的影响42
- 2.4.3 C源对菌株310b产漆酶的影响42-43
- 2.4.4 N源对菌株310b产漆酶的影响43
- 2.4.5 非营养有机物对菌株310b产漆酶的影响43
- 2.4.6 Cu~(2+)对菌株310b产漆酶的影响43
- 2.4.7 接种量对菌株310b产漆酶的影响43
- 2.4.8 转速对菌株310b产漆酶的影响43-45
- 3 讨论45
- 4 小结45-47
- 第四章 高产酶活菌株的培养特性47-54
- 1 材料与方法47-48
- 1.1 供试菌株47
- 1.2 培养基47-48
- 1.3 研究方法48
- 1.3.1 培养特性48
- 1.3.2 菌株间相互关系48
- 1.4 数据处理及分析48
- 2 结果与分析48-51
- 2.1 温度对菌株生长的影响48-49
- 2.2 不同碳源对菌株生长的影响49-50
- 2.3 不同氮源对真菌生长的影响50-51
- 2.4 菌株间的相互关系51
- 3 讨论51-53
- 4 小结53-54
- 第五章 高产酶活菌株的酶学性质54-62
- 1 材料与方法54-55
- 1.1 供试菌株54-55
- 1.2 研究方法55
- 1.2.1 酶活力测定55
- 1.2.2 粗酶液酶学性质55
- 2 结果与分析55-60
- 2.1 菌株产酶种类及相对酶活力大小比较55-56
- 2.2 不同菌株发酵粗酶液的酶学性质56-60
- 2.2.1 产羧甲基纤维素酶的酶学性质56-58
- 2.2.2 产木聚糖酶的酶学性质58-59
- 2.2.3 产漆酶的酶学性质59-60
- 3 讨论60-61
- 4 小结61-62
- 第六章 5株菌株不同酶系间协同作用62-69
- 1 材料与方法62-63
- 1.1 供试菌株62
- 1.2 研究方法62-63
- 1.2.1 不同菌株发酵粗酶液等体积混合酶活力测定62
- 1.2.2 不同菌株组合液体发酵产酶分析62-63
- 2 结果与分析63-67
- 2.1 不同菌株粗酶液混合酶活力的变化63-64
- 2.2 菌株组合液体发酵酶活力的变化64-65
- 2.3 菌株组合液体发酵不同酶系间协同作用分析65-67
- 3 讨论67-68
- 4 小结68-69
- 第七章 多酶系菌群对油菜秸秆降解活性的研究69-79
- 1 材料与方法69-71
- 1.1 供试菌株69-70
- 1.2 固体发酵培养基70
- 1.3 研究方法70-71
- 1.3.1 多酶系菌群组合设计70
- 1.3.2 油菜秸秆降解活性研究70-71
- 2 结果与分析71-76
- 2.1 固体发酵粗酶液酶活力的变化71-72
- 2.2 不同组合固体发酵体系还原糖含量的变化72
- 2.3 多酶系菌群降解油菜秸秆细胞壁物质效果72-74
- 2.3.1 油菜秸秆降解的感官评价72-73
- 2.3.2 油菜秸秆纤维素含量的测定结果73-74
- 2.4 粗酶液酶活力与降解活性之间的相关性分析74-75
- 2.5 多酶系菌群对秸秆表面降解的扫描电镜分析75-76
- 3 讨论76-78
- 4 小结78-79
- 第八章 主要结论与研究展望79-81
- 1.1 主要结论79
- 1.2 创新点79
- 1.3 存在问题79-80
- 1.4 研究展望80-81
- 参考文献81-95
- 导师简介95-96
- 个人简介96-97
- 致谢97
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