Mol Cancer：LncRNA NEAT1通过ATGL调控异常脂肪分解并促进肝癌增殖

文章背景简介   

肝细胞癌（HCC）是全球第六大常见癌症，也是导致男性癌症死亡的第二大原因。肝癌的进展主要表现为细胞分化异常、浸润生长快、转移早、恶性程度高、预后差等。代谢异常（包括脂质代谢异常），是癌细胞的一个重要特征。癌细胞中需要大量的脂肪酸来适应癌细胞的高增殖率，癌细胞可以通过脂肪生成和脂质分解途径来获得脂肪酸。

目前认为甘油三酯脂肪酶（ATGL）、激素敏感性甘油三酯脂肪酶（HSL）和单酰甘油脂肪酶（MAGL）是参与脂肪分解的主要酶。ATGL通过将三酰甘油（TAG）水解为二酰甘油（DAG）和FFA，启动TAG的代谢过程；之后HSL将DAG分解成单酰甘油（MAG）；最后MAG被MAGL进一步分解为FFA和甘油。Daniel等人发现脂溶酶MAGL通过MAGL-FFA途径促进迁移、存活和体内肿瘤生长。但也有其他研究显示MAGL具有抑制肿瘤的作用，表明脂溶酶在肿瘤进展中的作用还有待进一步研究。最近有研究发现通过RNAi或小分子抑制剂抑制ATGL可以抑制肿瘤细胞的生长和运动（结肠肿瘤细胞和非小细胞肺癌细胞），然而其对肝癌细胞的影响仍不清楚。

长链非编码RNA NEAT1在包括肝癌的各种类型的癌症中均有上调，有报道称其与癌症患者预后不良有关。现已证明NEAT1可通过与常见的microRNA结合来发挥竞争性内源RNA的功能，但NEAT1影响肿瘤进展的分子机制依然还需进一步研究。

2018年，哈尔滨医科大学的Liu X等人，在《Molecular Cancer》杂志（IF2018=7.776，医学1区）发表了题为“Long non-coding RNA NEAT1-modulated abnormal lipolysis via ATGL drives hepatocellular carcinoma proliferation”的文章，对lncRNA-NEAT1介导的异常脂肪分解及其对肝癌细胞生长的影响展开了系列研究。

所用到的主要方法

1.慢病毒感染

2.瞬时转染

3.CCK-8

4.Western Blot

5.免疫组化

6.Real time-PCR

7.FISH（fluorescence in situ hybridization）：是一种重要的非放射性原位杂交技术。它的基本原理是：如果被检测的染色体或DNA纤维切片上的靶DNA与所用的核酸探针是同源互补的，二者经变性-退火-复性，即可形成靶DNA与核酸探针的杂交体。

8.荧光素酶报告实验

9.统计学分析

文章主要内容

代谢异常，包括脂质代谢异常，是癌细胞的一个特征。已有研究表明，脂肪生成途径可能促进肝细胞癌（HCC）的发生发展。然而，肝癌细胞中脂肪分解途径的作用尚未阐明。本文通过RT-PCR、Western Blot和免疫组化等技术，比较了人肝癌组织和正常肝组织中脂肪甘油三酯脂肪酶（ATGL）的水平以及NEAT1-ATGL介导的肝癌细胞和肝癌组织中二酰基甘油（DAG）和游离脂肪酸（FFA）水平。文章还通过体外和原位异种移植肝癌小鼠模型中评估了ATGL、DAG、FFA和NEAT1对肝癌细胞增殖的影响。此外还通过荧光素酶报告基因实验进一步分析了NEAT1/ATGL与miR-124-3p之间的相互作用。

结果显示：肝细胞癌组织中甘油三酯脂肪酶（ATGL）呈现出显著的高表达，且肝细胞癌组织中存在高水平的DAG和FFA。lncRNA-NEAT1可以调节ATGL的表达，并通过ATGL破坏肝癌细胞的脂肪分解；ATGL及其产物DAG和FFA与NEAT1介导的肝癌细胞生长有关；NEAT1通过结合miR-124-3p调控ATGL表达。此外，敲除NEAT1可通过miR-124-3-p/ATGL/DAG+FFA/PPARα等信号通路减弱肝癌细胞的生长。综上所述，NEAT1通过ATGL调节异常脂肪代谢，从而促进肝癌细胞的增殖。

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