山东：水质 磺胺类、喹诺酮类和大环内酯类抗生素的测定 液相色谱-三重四极杆质谱法征求意见稿

大气网讯:环保网获悉：日前，山东省环保厅发布水质 磺胺类、喹诺酮类和大环内酯类抗生素的测定 液相色谱-三重四极杆质谱法征求意见稿： 

前 言

本标准按照GB/T 1.1-2009给出的规则起草。

本标准附录A为规范性附录，附录B、附录C、附录D、附录E为资料性附录。

本标准由山东省环保标准化技术委员会归口。

本标准起草单位：山东省环境监测中心站。

本标准验证单位：济南市环境监测中心站、泰安市环境保护监测站、山东省分析测试中心、山东省产品质量检验研究院、青岛谱尼测试有限公司、青岛市华测检测技术有限公司。

本标准主要起草人：郭文建、张慧、朱晨、王桂勋、岳太星、李红莉、丁波涛。

本标准为首次发布。

本标准由山东省环境保护厅提出并负责解释。

水质 磺胺类、喹诺酮类和大环内酯类抗生素的测定

液相色谱-三重四极杆质谱法

警告：实验中使用的溶剂和试剂均具有一定的毒性，对健康具有潜在的危害，应尽量避免与这些化学品的直接接触。样品制备过程应在通风橱中进行，操作时应按规定要求佩戴防护器具;所用试剂及分析后的样品需回收并进行安全处理。

1 适用范围

本标准规定了测定水中12种磺胺类、喹诺酮类、大环内酯类抗生素的液相色谱-三重四级杆质谱法。

本标准适用于地表水、地下水和废水中磺胺间甲氧嘧啶、磺胺嘧啶、磺胺二甲氧嘧啶、磺胺甲恶唑、磺胺二甲嘧啶;诺氟沙星、环丙沙星、氧氟沙星、氟罗沙星;脱水红霉素、罗红霉素、螺旋霉素的定性和定量检测。

当富集水样体积为500 ml，浓缩后定容体积为1.0 ml，进样体积为20 μl时，固相萃取的方法检出限范围为0.7 ng/L～6.9 ng/L，测定下限范围为2.8 ng/L～27.6 ng/L，详见附录A。

2 规范性引用文件

本标准内容引用了下列文件或其中的条款。凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。

HJ/T91 地表水和污水监测技术规范

HJ/T164 地下水环境监测技术规范

3 方法原理

水样调节pH为2.0～4.0左右，经滤膜过滤除去颗粒物，水样中的抗生素类化合物经固相萃取柱富集净化，采用液相色谱-三重四极杆质谱法分离检测。采用电喷雾正离子模式电离，多反应监测(MRM)方式，根据目标化合物的保留时间和特征离子峰定性，内标法定量。

4 干扰与消除

在本方法规定的条件下，为防止金属离子与抗生素结合形成络合物，干扰固相萃取过程，降低此类化合物的提取效率。可向水样中加入乙二胺四乙酸四钠，抑制金属离子的干扰。水中余氯等其他具有氧化性的有机物会干扰磺胺类抗生素的测定，可向水中(按0.5L计)加入150 mg抗坏血酸去除干扰。

5 试剂和材料

除非另有说明，分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂，实验用水为新制备的不含目标化合物的纯水。

5.1 盐酸： (HCl)=1.189 g/ml，分析纯。

5.2 硫酸： (H2SO4)=1.84 g/m，分析纯。

5.3 乙腈(CH3CN)，色谱纯。

5.4 甲醇(CH3OH)，色谱纯。

5.5 甲酸 (HCOOH)：色谱纯。

5.6 乙二胺四乙酸四钠(Na4EDTA)，分析纯。

5.7 抗坏血酸(C6H8O6)。

5.8 盐酸溶液：量取50ml盐酸(5.1)，缓慢加入到纯水中，待温度降至室温后，用纯水定容到100 ml。

5.9 硫酸溶液：c(H2SO4)=4.0 mol/L。量取22 ml硫酸(5.2)，缓慢加入到纯水中，待温度降至室温后，用纯水定容到100 ml。

5.10 pH=2.0去离子水：用盐酸(5.8)溶液调节去离子水至pH=2.0。

5.11 0.1%甲酸去离子水溶液：量取0.5 ml甲酸(5.5)，缓慢加入到纯水中，待温度降至室温后，用纯水定容到500 ml。

5.12 甲醇/乙腈混合溶液：1+1。

5.13 0.1%甲酸甲醇/乙腈混合溶液：量取0.5 ml甲酸(5.5)，缓慢加入到甲醇/乙腈混合溶液(5.12)中，用甲醇/乙腈混合溶液定容到500 ml。

5.14 稀释溶剂：0.1%的甲酸去离子水溶液(5.11)/0.1%甲酸甲醇/乙腈混合溶液(5.13)，3+1。

5.15 抗生素标准贮备液：ρ=100 mg/L(参考浓度)

可直接购买有证标准溶液，也可用标准物质(纯度≥95%)制备。贮备液在0℃-4℃避光保存或参照制造商的产品说明。使用时应恢复至室温，并摇匀。

使用标准物质制备标准贮备液的参考方法：准确称取10.0 mg抗生素类化合物标准物质，溶于100 ml甲醇(5.4)中，最终浓度为100 mg/L。

脱水红霉素可直接购买标准物质(纯度≥95%)或者由红霉素制备，推荐的制备方法为：量取400 μl 100 mg/L红霉素贮备液于20 ml棕色瓶中，加入19.6 ml甲醇(5.4)，然后加入约10 μl硫酸溶液(5.9)调pH至酸性，室温静置4 h后完成转化过程，可于-10℃以下避光保存2个月。

5.16 抗生素类化合物标准使用液：ρ=1.0 μg/ml(参考浓度)

将12种抗生素类化合物标准贮备液(5.15)按需要用甲醇(5.4)稀释。标准使用液于-10摄氏度以下避光保存，保质期2个月。使用时应恢复至室温，并摇匀。

5.17 内标贮备液：ρ=200 μg/ml(参考浓度)

内标物为13C3 Atrazine(阿特拉津)。内标可直接购买有证标准溶液，也可用标准物质(纯度≥99%)制备。贮备液应在-10℃以下避光保存或参照制造商的产品说明。使用时应恢复至室温，并摇匀。

5.18 替代物贮备液：ρ=200 μg/ml(参考浓度)

喹诺酮类回收率替代物为环丙沙星-d8、磺胺类回收率替代物为磺胺二甲氧嘧啶-d6、大环内酯类替代物为脱水红霉素-d6。替代物可直接购买有证标准溶液，也可用标准物质(纯度≥95%)制备。贮备液应在-10℃以下避光保存或参照制造商的产品说明。使用时应恢复至室温，并摇匀。

5.19 内标使用液：2.0 μg/ml(参考浓度)

将内标贮备液(5.17)按需要用甲醇(5.4)稀释。内标使用液于冷冻保存，保质期1个月。使用时应恢复至室温，并摇匀。

5.20 替代物使用液：2.0 μg/ml(参考浓度)

将替代物贮备液(5.18)按需要用甲醇(5.4)稀释。替代物使用液于冷冻保存，保质期1个月。使用时应恢复至室温，并摇匀。

5.21 固相萃取柱：填料为二乙烯苯和N-乙烯基吡咯烷酮共聚物(HLB)或同等柱效的萃取柱，规格为6 ml/500 mg。

5.22 滤膜：0.7 µm玻璃纤维或其他材质等效滤膜。

5.23 滤膜：0.22 µm聚四氟乙烯或其它等效滤膜。

5.24 氮气：纯度≥99.99%。